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2006.03.30

シトクロムＰ４５０モノオキシゲナーゼの生産方法

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出願番号 : 特許出願２００５－３８５７６出願日 : ２００５年２月１６日

出願人 : 株式会社海洋バイオテクノロジー研究所発明者 : 野舘美保外４名

発明の名称 : シトクロムＰ４５０モノオキシゲナーゼの生産方法

【課題】 P450モノオキシゲナーゼ遺伝子を大腸菌等の微生物宿主内で安定的に機能発現させる方法を提供する。
【解決手段】シトクロムP450モノオキシゲナーゼと古細菌由来のPPIaseの両者を生産可能な微生物、又はシトクロムP450モノオキシゲナーゼのN末端側に古細菌由来のPPIaseを付加した融合タンパク質を生産可能な微生物を培養し、培養物又は菌体からシトクロームP450モノオキシゲナーゼを採取することを特徴とするシトクロームP450モノオキシゲナーゼの生産方法。

【P450関連資料】
出願番号 : 特許出願２００１－２０８８３９出願日 : ２００１年７月１０日
公開番号 : 特許公開２００２－３４５４８３公開日 : ２００２年１２月３日

発明の名称 : 植物ブラシノステロイド生合成におけるシトクロムＰ４５０ヒドロキシラーゼをコードする核酸分子

【課題】ブラシノステロイドは単独に作用しないが、植物の生長および発育の空間的かつ一時的な調節のために、その他の生長レギュレーターおよび環境因子、例えば、光およびストレスと協力する。それ故、ブラシノステロイドの役割および作用メカニズムならびにそれらが環境因子と相互作用する方法についての分子上の手がかりをさらに解明する。
【解決手段】植物においてC-2ヒドロキシル化によるブラシノステロイド生合成を触媒作用する暗所誘導シトクロムP450ヒドロキシラーゼをコードする核酸分子を提供する。またシトクロムP450ヒドロキシラーゼ又はこのような酵素の生物活性のある断片を合成するための発現カセット及びプラスミドの使用のための方法及びプロセスを記載する。

出願番号 : 特許出願２００４－５１０４２９出願日 : ２００２年５月３０日
公表番号 : 特許公表２００５－５２８１０９公表日 : ２００５年９月２２日
出願人 : ５０４１６２１１０発明者 : コスメ，ジョゼ外４名

発明の名称 : シトクロムＰ４５０タンパク質の精製法および結晶化法

本発明は、シトクロムP450分子の精製法を提供し、この方法は、シトクロムP450分子を宿主細胞培養物において発現させること；前記培養物から前記細胞を回収して高塩濃度バッファー中に前記細胞を懸濁すること；前記細胞を溶解して細胞片を除去し、高塩濃度溶解液を得ること；前記溶解液に界面活性剤を添加して高塩濃度-界面活性剤溶解液を得ること；ならびに前記溶解液から前記P450を回収することを含んでなる。本方法は結晶化に適したP450タンパク質の収量を与える。

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