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GMPとは?
HPLC、GCとは?
高速液体クロマトグラフィー(High performance liquid chromatography、略してHPLCということが多い)はカラムクロマトグラフィーの一種であり、機械的に高圧をかけた液体によって分析物をカラムに通し、それによって各物質が固定相に留まる時間を短くして分離・検出能力を高くするのが特長である。
現在では分析物の注入から検出・定量までを一体化して自動的に行えるようにした装置を用いて、再現性の高い分析が比較的簡便に行える。分析化学や生化学で頻繁に用いられ、俗に「液クロ」といえばこれを指すことが多い。
この方法を用いると各物質は鋭いピークとして検出され、分離(他の物質のピークと明確に分けられる)および検出(鋭いピークにより高い感度が得られる)の能力が一般の液体クロマトグラフィーより良くなる。移動相としては混じり合う液体なら、カラムや装置に悪影響を与えない範囲で何でも使える(水や塩類の水溶液、アルコール、アセトニトリル、ジクロロメタンなどの有機溶媒)。溶媒の組成に勾配を付けて(すなわち組成を連続的に変えて)溶出を行うことも多い。たとえば水/メタノール勾配を使う場合、疎水性の高い物質はメタノールの多い条件で溶出しやすく、親水性の高い物質はメタノールの少ない条件で溶出しやすい。
「検出器」
検出器としては目的とする物質の性質に応じて光学的性質(吸光度、屈折率、蛍光)、電気化学的性質、質量分析法などを利用する装置がある。
「逆相HPLC」
従来のタイプのHPLCでは固定相が極性であるが、逆に固定相が非極性(疎水性)の場合を逆相HPLCと称する。逆相HPLCでは疎水性の物質がカラムに留まり、移動相の液体の疎水性物質の割合が高くなるほど溶出が速くなる。疎水性の高い化合物の分析によく用いられる。
「GCとは」
ガスクロマトグラフィー(Gas Chromatography, GC)はクロマトグラフィーの一種であり、気化しやすい化合物の同定・定量に用いられる機器分析の手段、またはそれにもちいる装置のことをいう。サンプルと移動相が気体であることが特徴である。
注入口からシリンジ等で打ち込まれたサンプルは、まず高温の気化室で気化した後、キャリアガスによってカラムに移動する。クロマトグラフィーの原理によって各成分は分離され、その後検出器で電気信号に変換される。 時間を横軸に、検出器から得られた信号強度を縦軸にとることでクロマトグラムが得られ、保持時間から物質の同定、面積から定量を行う。
ガスクロマトグラフィーでの分析では、各成分のピークが十分に分離する条件を見つけることが重要であり、カラムの種類の選択とカラム温度の制御が大切である。特に、保持時間が長いとピークがブロードになるので、カラム温度を昇温しながら分析を行うことが多い。
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